上海恒远生物科技有限公司
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一、参数规格
【产品名称】：人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒
【检测种属】：人、大鼠等动植物。
【产品用途】：被测样品定性或定量分析
【产品规格】：96T/48T(两种规格)
【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】：2-8℃
【供 货 期】：1-3天(现货供应)
【产品性状】：液体盒装
【服务X势】：全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测
【样本储存】：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
二、“人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒”特点概述
1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原(或抗体)，使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。
2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。
3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。
4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。
5.可以定量测定。溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。
6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。
7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置
8.价格X惠，质量保证，X大限度的节省实验经费。
三、“人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒”具体操作方法
以双抗体夹心法为例展示：
1、双抗体夹心法检测抗原
操作步骤如下：
1）将特异性抗体与固相载体结合，形成固相抗体。洗涤除去尚未结
合的抗体及一些杂质。
2）加入待测标本，保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3）加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4）加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色，测知标本中抗原的量。在临床检验中，此法适用于检验各种蛋白质等大分子抗原，例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要获得针对受检抗原的特异性抗体，就可用于包被固相载体和制备酶结合物而建立此法。如抗体的来源为抗血清，包被和酶标所使用的抗体X好分别取自不同种属的动物。如应用单克隆抗体，一般选择两个针对抗原上不同决定簇的单抗，分别用于包被固相载体和制备酶结合物。这种双位点夹心法具有很高的特异性，而且可以将受检标本和酶标抗体一起保温反应，作一步检测。
在一步法测定中，当标本中受检抗原的含量很高时，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结合，而不再形成"夹心复合物"。类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象，此时反应后显色的吸光值（位于抗原过剩带上）与标准曲线（位于抗体过剩带上）某一抗原浓度的吸光值相同，如按常法测读，所得结果将低于实际的含量，这种现象被为钩状效应（hook effect），因为标准曲线到达高峰后呈钩状弯落。钩状效应严重时，反应甚至可不显色而出现假阴性结果。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质（例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等）时，应注意可测范围的X高值。用高亲和力的单克隆抗体制备此类试剂可削弱钩状效应。
四、ELISA注意事项
1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
2.洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3.一次加样时间X好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，X好做复孔。
5.如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请X后乘以稀释倍数。
6.在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
7.底物请避光保存。
8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
五、“人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒”常见问题
实验中X可能出现问题
一、所有孔未显色？
分析原因：
1、微孔加入抗体后，洗板不彻底，微孔中存在游离的抗体。
2、用错试剂。
3、在操作中忘记加酶或抗体。
解决办法：
1、检查洗板器械，比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加样前，要看清瓶签。
3、严格按说明书操作步骤进行实验，确保每步都到位。
二、所有孔显色偏低？
分析原因：
1、微孔加入抗体后，洗板不彻底，微孔中存在游离的抗体。
2、洗板不干净。
3、抗体污染了酶结合物等其它试剂。
4、温度没达到要求。
5、每孔加入的试剂量低于说明书要求量。
解决办法：
1、手工加蒸馏水洗板时，要避免吸头接触微孔，常更换新的蒸馏水。
2、洗板时要确保每孔都注满蒸馏水（约400ul），且至少洗板五次。
3、严格按说明书要求操作，每次取样要更换吸头。
4、控制孵育温度在25℃。
5、加样器吸头安放牢固避免吸样不足，加样时务必将吸头内液体打尽。
